复习资料：2019年1月自考《生物制药技术》重点串讲一

第一章  绪论
1．发现发酵过程是微生物作用的结果的人是巴斯德。
2．在现代生物过程中，基因工程是定向改造生物遗传性的主导性技术。
3．现代生物工程根据操作对象及目的，可分为基因工程、微生物工程、细胞工程、酶工程等。
4．细胞融合是改造生物遗传性的重要途径。
5．原始生物工程以非纯种微生物自然发酵工艺为标志。
6．近代生物工程是采用纯种微生物的发酵工艺。


第二章  基因工程
1．基因工程是在发现细菌限制性核酸内切酶、DNA重级及DNA顺序分析获笪成功基础发展和成熟的。
2．DNA顺序分析技术，为基因结构分析，基因图谱制备及基因合成提供了重要分析手段。
3．基因工程最大特点是打破生物种属界限，进行种属内外基因重组，遗传信息交换和转移。
4．基因工程技术也称重组DNA或分子克隆。
6．重组DNA技术通常包括：载体的选择和制备，目的基因的分离纯化。目的基因与载体的重组，重组体的转化、重组克隆的筛选、基因表达与产物纯化。
7．质粒是指能在细胞内寄生和复制的复制子。
8．质粒的复制不受宿主染色体控制。
9．质粒为双链闭鸽不状DNA分子。
10．质粒可分为自身传递性质粒。
11．雄性大肠杆菌表面的性纤毛是一种接合质粒形成的表面物质。
12．根据质粒在细胞中拷贝数的不同，可把质粒分为松驰型质粒和严紧型质粒。
13．严紧质粒大多为具有自身传递能力的大质粒。
14．分子量较大，自身传递上严紧型质粒的特点。
15．分子量较小，不具自身传递性是松驰型质粒的特点。
16．基因工程中使用的质粒都是松驰型质粒。
17．松驰型质粒可被氯霉素扩增。
18．细菌收获可通过离心进行。
19．细菌裂争可采用：非离子型或离子型去污剂，有机溶剂，碱处理及加热处理。
20．λ噬菌体长约48.5kb。
21．野生型λ噬菌体为双链线形分子，具有12个碱基的粘性末端，进入大肠杆菌之后可以互补成环。
22．λ噬菌体既可溶菌生长，又可溶源生长。
23．λ噬菌体适于克隆大片段DNA及组建原核基因文库。
24．科期质粒是一种人工质粒。
25．科斯质粒是克隆大片段DNA及组建真核基因文库的有效手段。
26．M13噬菌体是一种单链DNA噬菌体。
27．M13噬菌体只能感染雄性大肠肝菌。
28．M13噬菌体形成浑浊斑。
29．汞离子可以特异地与dA、dT结合。
30．目前分离目的基因的方法主要有直接分离法，构建基因文库法，酶促合法及化学合成法。
31．构建基因文库法主要应用于原核生物。
32．酶促合成法主要应用于真核生物。
33．酶促合成法的前提是必须首先得到该目的基因的mRNA。
34．化学合成法必须已知该基因的核长苷酸顺序或蛋白质的氨基酸序列。
35．DNA连接酶可催化DNA连接酶可催化DNA链的5^，-磷酸基与另一条DNA链的3^，-羟基生成磷酸二酯键。
36．大肠杆菌DNA连接酶以DAN为辅因子。
37．T₄DNA连接酶以ATP为辅因子。
38．T₄DNA可以催化DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA，双链DNA的粘末端或钝端连接。
39．大肠杆菌DNA连接酶只能催化DNA双链的单链缺口和带粘性末端的双链DNA。
40．TDT即末端脱氧核苷酸转移酶。
41．DNA连接酶的最适温度是37⁰C。
42．连接反应温度应介于催化反应与末端粘合之间。
43．根据受体系统不同，基因工程可分为微生物基因工程、动物基因工程和植物基因工程。
44．关于感受态本质的假说包括局部原生质体化假说及酶受体假说。
45．大肠杆菌感受的制备方法包括Hanahan法，氯化钙法及电转化法。
46．局限性转导只能转导宿主染色体上少数基因。
47．普遍性转导可转导宿主染色体上任何基因。
48．β-半乳糖基因插入失活法的重组质粒产生白色菌落。
49．不带β-半糖苷酶活性蛋白的菌落中央也可出现淡蓝色斑点。
50．动植物病毒也可作为外源基因的载体。
51．目的基因重组克隆的筛选方法包括：根据重组体表型筛选，重组体结构分析法，检测目的基因法及检测目的基因表达产的法。
52．原核生物中基因表达以操纵子形式进行。
53．原核生物细胞没有核膜，因此表达过程中的转录与翻译往往同时进行。
54．原核生物的mRNA在翻译完毕之后，随即被水解掉。
55．真核生物转录成不均-RNA之后，还需加工，如去掉内含子，修饰，加工5^，，末端和3^，末端。
56．基因工程中基因表达的研究，是指外源基因在某一种细胞中的表达活动。
57．大肠杆菌，酵母与哺乳动物细胞三大基因表达体系已成为当前基因工程工业性生产的核心。
58．基因表达合成功能蛋白的基本条件是依赖于基因的有效转录，mRNA正确的转译和转译后的加工。
59．阅读框架是由起始密码子决定的。
60．用于保证目的基因处于正确的阅读框架中的方法有：选用适当的酶切位点；用人工接头调节阅读框架；构建一组适合不同阅读框架的载体。
61．基因的表达受到启动子等调控元件的控制。
62．基因的高效表达必须依赖一个强的启动子。
63．适当的启动子，只能保证目的基因的正确转录，而并不能保证基因的完全正确表达。
64．对已知功能的基因表达产物的检测，可以采用蛋白质电泳，免疫扩散和凝集，酶联免疫和放射免疫等方法。
65．对未知目的基因功能的表达产物的检测方法是在携带有重组体分子的细胞中寻找新合成的蛋白质。
66．应用大细胞系统检测基因表达时，主要是利用质粒或λ载体扩增的途径。
67．微细胞不含有染色体DNA。
68.HbsAg是指乙肝表面抗原。
69．HGH是指人生长激素。
70．HGH可以治疗侏儒症，促进烧伤及骨折等创伤性组织的恢复。

• 上一篇：复习资料：2019年1月自考《生物制药技术》重点名词解释二
• 下一篇：复习资料：2019年1月自考《生物制药技术》重点串讲二